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Engenharia Genética


Área Científica: Biologia e Bioquímica
Ano: 2º
Semestre: 2
Créditos: 6 ECTS
Horas de contacto: 30 T, 30 PL, 4 OT

Objectivos/Competências adquiridas:

Compreender a informação genética em bactérias.
Compreender a importância das ferramentas do ADN recombinante e a sua aplicação nos diferentes sistemas de clonagem (hospedeiro-vector).
Conhecer os diferentes processos de construção, transformação e seleção de mutantes.
Relacionar a mutagénese dirigida e a estrutura/função da proteína.
Estabelecer as múltiplas aplicações das metodologias da Engenharia Genética nas diferentes áreas do conhecimento biológico.
Desenvolvimento de competências que permitam a atualização e o progresso num domínio científico e de aplicação tão dinâmico quanto é a Engenharia Genética.

Conteúdo da unidade curricular:

TECNOLOGIA DO DNA RECOMBINADO: Enzimas de restrição e ligases; vectores de clonagem; preparação de rDNA, introdução na célula e seleção de recombinantes; bancos genómicos; expressão homóloga e heteróloga; vectores de expressão/superprodução e purificação de r-proteínas. Instabilidade segregacional e estrutural dos r-plasmídeos: cinética e controlo. OUTRAS ABORDAGENS MOLECULARES E APLICAÇÕES – Hibridação DNA-DNA-sondas, hibridação de Southern e aplicações. Genotipagem: e aplicações. Métodos para analisar a regulação da expressão genética: fusões com um gene reporter, hibridação de Northern e RT-PCR em tempo real. Eliminação ou mutação por inserção de genes em análise funcional; mutagénese dirigida e aplicações, tecnologia de RNA antissenso e RNAi. Localização subcelular de proteínas: fusões GFP e immunodeteção. Sequenciação de fragmentos de DNA e de genomas.

Bibliografia recomendada:

Griffiths A.J.F., Gelbart W.M., Lewontin R.C., Miller J.H. (2002) Modern Genetic Analysis: Integrating Genes and Genomes, 2ª Ed., W.H. Freeman, New York
Hartl D., Jones E. (2005) Genetics. Analysis of Genes and Genomes, 6ª Ed., Jones & Bartlett Publ.
Lewin B. (2000) Lehninger Principles of Biochemistry, 3rd ed.
Lewin B. (2008) Genes IX, 9th ed., Jones and Barlett Publishers.
Sambrook J. et al. (1989) Molecular Cloning: a Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press.
Sambrook J., Russell D.W. (2001) Molecular cloning : a laboratory manual 3ª ed., Cold Spring Harbor Laboratory, New York
Weaver R.F. (2011) Molecular Biology, 5rd ed., McGraw Hill.
Wilson K., Walker J. (2005) Principles and Techniques of Biochemistry and Molecular Biology. Sixth edition. Cambrige University Press, New York. USA.


T = teóricas; TP = teórico-práticas; PL = ensino prático e laboratorial; TC = trabalho de campo; S = seminário; E = estágio; OT = orientação tutória;